ELISA法で正しいのはどれか。

解説

ELISA法は、固相に抗原または抗体を吸着させ、液相中の標的物質（抗体または抗原）と反応させた後、未反応の液相成分を洗い流すことで固相と液相を分離するB/F分離が必須です。これにより非特異的な結合を除くことで感度と特異度を確保します。

選択肢ごとの解説

• 1. 正解。ELISA法は、固相化した抗原または抗体と液相中の検体成分を反応させた後、未反応成分を除去するために洗浄操作を行い、固相（Bound）と液相（Free）を分離することが必須の工程です。選びやすい理由：ELISA法の基本原理の一つであるため、原理を理解していれば正しいと判断できます。混同注意：B/F分離が不要な均一系免疫測定法（例：ラテックス凝集法）と混同する可能性があります。
• 2. HIV感染のスクリーニング検査にELISA法は広く用いられますが、確認試験にはウエスタンブロット法や核酸増幅検査（NAT）が適用されます。ELISAは偽陽性が出ることがあるため、確定診断にはさらに特異度の高い検査が必要です。正しくは：HIV感染のスクリーニング試験に適用されます。選びやすい理由：ELISAがHIVの検査に広く使われているという事実から、確認試験にも使われると誤解しやすいです。混同注意：スクリーニング検査と確認検査の役割の違いを混同しやすいです。
• 3. ELISA法は、酵素反応によって生成される発色物質の吸光度を測定するため、マイクロプレートリーダー（吸光度計）を使用します。液体シンチレーションカウンターは放射性同位元素を標識に用いるRIA法などで使用されます。正しくは：測定にはマイクロプレートリーダー（吸光度計）を使用します。選びやすい理由：RIA法などの他の免疫測定法で使用される測定機器と混同しやすいです。混同注意：ELISAの酵素反応による発色と、RIAの放射能測定を混同しやすいです。
• 4. ELISA法では、固相化のために抗原や抗体を効率よく吸着させる必要があるため、通常、底部が平底（フラットボトム）のマイクロプレートが用いられます。U字型やV字型のプレートは凝集反応などに適しています。正しくは：通常、底部が平底のマイクロプレートが用いられます。選びやすい理由：マイクロプレートが使われること自体は正しいので、底の形状まで意識していないと誤りだと気づきにくいです。混同注意：凝集反応などで使用されるマイクロプレートの形状と混同しやすいです。
• 5. ELISA法は、逆受身赤血球凝集反応（RPHA）と比較して、一般的に感度が高いです。ELISA法はピコグラムレベルの測定が可能であり、RPHAよりも微量な物質の検出に適しています。正しくは：その感度は逆受身赤血球凝集反応より高いです。選びやすい理由：両者とも免疫学的検査法であるため、感度が同程度と誤解しやすいです。混同注意：異なる原理を持つ免疫学的検査法の感度を比較する知識が不足していると、誤った判断をしやすいです。

国試ポイント

ELISA法の原理、構成、測定機器、および他の免疫学的測定法との比較について正確に理解することが重要です。

混同注意

ELISA法とRIA法におけるB/F分離の必要性、およびHIV検査におけるスクリーニングと確認試験の違いを混同しやすい。

次に同じ論点が出たら

ELISA法の原理を問われた際は、「酵素免疫測定法」「固相化」「B/F分離」「酵素反応による発色・吸光度測定」のキーワードが含まれているかを確認します。

関連知識

ELISAには直接法、間接法、サンドイッチ法、競合法があり、それぞれ標識物質（酵素）や反応ステップが異なる。標識酵素としてHRP（西洋わさびペルオキシダーゼ）やALP（アルカリホスファターゼ）がよく用いられる。