FISH法について正しいのはどれか。2つ選べ。

解説

FISH法は、染色体上の特定の遺伝子領域を蛍光標識されたプローブとハイブリダイズさせることで、その位置や数、異常を検出する分子細胞遺伝学的手法です。染色体転座やキメラ遺伝子（融合遺伝子）のような構造異常の検出に広く用いられます。観察には蛍光顕微鏡が必要です。標本は蛍光色素の退色により永久保存には向かず、核の対比染色にはDAPIなどが用いられます。

選択肢ごとの解説

• 1. FISH法で用いる蛍光色素は退色しやすいため、標本は一時的なものであり、長期保存には適さない。核型分析に用いるGバンド染色標本などと比較して、保存性には劣る。正しくは：作製された標本は、蛍光色素の退色により一時的なものとなる。選びやすい理由：一般的な病理標本が永久保存されるため、組織学的検査全般にわたって標本が恒久的であると誤解しやすい。混同注意：通常のHE染色などの永久標本。
• 2. 正解。FISH法は、特定の遺伝子領域や染色体領域を蛍光プローブで標識し、細胞内の位置を視覚化するため、染色体転座のような構造異常の検出に非常に有効である。
• 3. FISH法で標識された蛍光シグナルを観察するためには、蛍光顕微鏡が必要である。偏光顕微鏡は複屈折性を持つ物質の観察に用いられる。正しくは：観察には蛍光顕微鏡を使用する。選びやすい理由：様々な種類の顕微鏡があるため、知識が曖昧だと誤った顕微鏡を選択してしまう可能性がある。混同注意：蛍光顕微鏡と偏光顕微鏡の用途の違い。
• 4. 正解。FISH法は、特定の遺伝子配列を持つプローブを用いて細胞内の遺伝子を検出するため、融合遺伝子（キメラ遺伝子）の存在を視覚的に確認するのに適している。例えば、BCR-ABL融合遺伝子などの検出に用いられる。
• 5. FITCは蛍光プローブ自体を標識する際に広く用いられる蛍光色素であるが、細胞核全体の対比染色（カウンターステイン）には、DAPI（4',6-ジアミジノ-2-フェニルインドール）などの核酸結合性蛍光色素が一般的に使用される。正しくは：細胞核の対比染色にはDAPIなどが用いられる。選びやすい理由：FITCが蛍光色素として非常に有名であるため、核染色にも使われると誤解しやすい。また、蛍光顕微鏡観察に関連する知識が問われている点で、関連性が高いと感じやすい。混同注意：蛍光プローブを標識する色素と、核を対比染色する色素の違い。

国試ポイント

FISH法の基本的な原理、用途、およびそれに伴う手技や観察方法に関する知識が問われています。特に、どのような目的で、どのようなツール（顕微鏡、色素）が使われるか、またその特徴（標本の保存性）を正確に理解しているかが重要です。

混同注意

FISH法とGバンド法などの他の染色体検査法との用途や原理の違い、また、蛍光色素の種類とそれぞれの役割（プローブ標識 vs. 核対比染色）について混同しやすいです。

次に同じ論点が出たら

次に同様の論点が出た場合、FISH法のどの種類のプローブ（例：セントロメアプローブ、テロメアプローブ、ペインティングプローブ、融合プローブ）が、どのような遺伝子異常の検出に適しているか、さらに深く問われる可能性があります。また、より新しい遺伝子検査技術（次世代シーケンサーなど）との比較も重要になります。

関連知識

FISH法の種類（インターフェースFISH、メタフェーズFISHなど）、様々な遺伝子異常（欠失、重複、異数性）の検出、臨床応用例（がん診断、出生前診断など）、FISH法以外の分子細胞遺伝学的手法（CGH、マイクロアレイなど）。